O Citomegalovírus Humano (CMV) pode causar morbimortalidade em pacientes imunocomprometidos. O HCMV pode ser transmitido por transfusão sanguínea e está associado a infecções assintomáticas em recém-nascidos e jovens, podendo causar infecções semelhantes à mononucleose quando ocorrem infecções sintomáticas. Uma das maiores preocupações em pacientes que necessitam de transfusão é a infecção por HCMV, que pode ocorrer após o término da profilaxia, em pacientes submetidos a transplante de órgão que recebem sangue ou hemoderivados de doador soropositivo, onde o receptor e negativo (D+/R-). O objetivo do estudo foi estimar a prevalência sorológica e molecular da infecção por HCMV entre doadores de sangue do Instituto Estadual de Hematologia Arthur de Siqueira Cavalcanti (HEMORIO). No total, 1140 individuais foram analisados. A presença do HCMV DNA foi avaliada em pools por PCR em tempo real (qPCR), as amostras foram agrupadas em 184 pools. Em 9,2% (17/184) dos pools foi detectado o HCMV DNA. Até o momento a sorologia foi realizada em 1019 amostras (89%) e a prevalência foi de 96,17% (980/1019) de anti-HCMV IgG. Os resultados positivos no qPCR serão confirmados pela testagem individual das amostras correspondentes aos pools com CT <40. O presente foi importante para estimar a prevalência sorológica, detecção molecular do HCMV no Rio de Janeiro e verificar a proporção de doadores capazes de transmitir a infecção pelo HCMV para receptores de sangue.