Validação do tubo de reagentes seco DuraClone RE PC (Beckman Coulter-BC) na detecção de células plasmáticas residuais por citometria de fluxo (CF) por meio da compararação com o método atual padronizado baseado nas recomendações Euroflow através da combinação de anticorpos monoclonais líquidos.

Foram utilizadas sete amostras de medula óssea (MO) de pacientes em tratamento para neoplasias plasmocitárias para a avaliação de doença residual mensurável (DRM) e duas amostras de controle de qualidade externo do programa CAP. Comparamos a capacidade do tubo DURAClone RE PC (CD81, CD27, CD19, CD200, CD138, CD56, CD38, CD45) com um painel de dois tubos na configuração oito cores contendo anticorpos monoclonais líquidos (CD38, CD138, CD56, CD19, CD20, CD45, CD28, CD27, CD117, CD81, cyKappa e cyLambda). Foi utilizado o equipamento FACS Canto II (Becton Dickinson – BD) para o painel de anticorpos monoclonais líquidos e Navios (BC) para o tubo DURAClone RE PC. As análises de ambos os painéis foram realizadas no software Infinicity (Cytognos) e comparadas com o software Kaluza (Beckman Coulter). Os dados foram plotados em planilhas de Excel e a avaliados através teste de correlação.

A média do número total de eventos adquiridos do DuraClone foi de 1.198.689 (771.269 a 1.700.000), permitindo boa sensibilidade para o ensaio CF em comparação ao método padronizado, que foi de 2.465.072 (2.063.042 a 3.146.628), que por ser nosso método padrão foi utilizado maior volume amostral para marcação deste painel. Foi observado uma boa correlação entre o DURAClone e o método padrão em valores percentuais na identificação de doença residual mensurável para mieloma múltiplo (R2 = 0,9854) e boa correlação no percentual de células plasmocitárias normais (R2 = 0,9942). Apesar da diferença do número de eventos adquiridos, ambas as metodologias apresentaram concordância na conclusão diagnóstica em todos os casos avaliados.

O tubo DURAClone RE PC demonstrou bom desempenho na pesquisa de DRM em MM. A utilização do tubo de reagentes secos na prática clínica já está bem estabelecida e nos permite redução de custos por diminuir erros técnicos de pipetagem, redução no tempo de processamento, melhora a eficiência do laboratório, simplifica o controle de inventario de reagentes e titulação dos anticorpos. Entretanto sua utilização deve ser realizada com cautela, devido a falta dos anticorpos CD117, CD28 e imunoglobulinas intracitoplasmática kappa e lambda, que podem limitar a identificação de fenótipos aberrantes. Como solução alternativa equipamentos com configuração > 10 cores, existe a flexibilidade de adicionar mais marcadores nas fluorescências vagas.