Avaliar o desempenho do anti CD38 nano anticorpo de camelo JK36 por citometria de fluxo em pacientes com Mieloma Múltiplo tratados com Daratumumab.

Foram avaliadas 7 amostras de medula óssea de pacientes com Mieloma Múltiplo tratados com Daratumumab. Os marcadores imunofenotípicos estudados na rotina foram: Tubo 1 CD38 FITC (T16 - Beckman Coulter), CD56 PE, CD20 PERCP-Cy5.5, CD19 PC7, Kappacy APC, Lambdacy APC-H7, CD45 V450 e CD138 V500; Tubo 2 CD38 FITC (T16 - Beckman Coulter), CD28 PE, CD27 PERCP-Cy5.5, CD19 PC7, CD117 APC, CD81 APC-H7, CD45 V450 E CD138 V500. Para a detecção da depleção do CD38, foi feito um Tubo Nano com os seguintes marcadores Kappacy FITC, CD56 PE, CD20 PERCP-Cy5.5, CD19 PC7, CD38 APC (nano anticorpo de camelo JK36 – Beckman Coulter), Lambdacy APC-H7, CD45 V450 e CD138 V500. As amostras foram analisadas pelo método de imunofenotipagem por citometria de fluxo, utilizando-se equipamento CANTO II (Becton Dickinson – BD) e a análise foi realizada no software Infinicyt (Cytognos). O máximo de eventos totais adquiridos foi de 3.400.000 com merge entre os tubos 1 e 2. Para o Tubo Nano, o máximo de eventos totais adquiridos foi de 1.700.000.

No painel utilizado na rotina (Tubo 1 e Tubo 2) a expressão do CD38 nos plasmócitos foi negativa em todas as amostras. Porém, em todas as amostras, foi possível identificar os plasmócitos através da expressão do CD138 em conjunto com múltiplas estratégias de gate que incluem as expressões de marcadores aberrantes. No Tubo Nano contendo o marcador CD38 Nano Anticorpo de Camelo (JK36) foi possível visualizar a expressão do CD38 nos plasmócitos de todas as amostras analisadas. Além disso, com esse marcador foi possível discriminar os plasmócitos anômalos dos normais.

As expressões de CD38 em conjunto com o CD138 caracterizam as células plasmáticas. A terapia alvo anti-CD38 (Daratumumab) induz a eliminação imunomediada de células que expressam CD38. A detecção das células plasmáticas pela citometria de fluxo com a utilização deste anticorpo convencional na superfície das células fica prejudicada após a utilização do Daratumumab. Os nano anticorpos que ocorrem naturalmente em camelídeos, são capazes de reconhecer epítopos ocultos e não bloqueados por terapias alvo permitindo a detecção de células plasmáticas em pacientes com Mieloma Múltiplo após tratamento. Em nosso estudo demonstramos que o anticorpo CD38 Nano Anticorpo de Camelo (JK36) foi capaz de detectar células plasmáticas em pacientes após o uso de Daratumumab. Embora tenha sido possível identificar os plasmócitos através da expressão do CD138, está estratégia torna-se muito arriscada e de difícil aplicabilidade pois a expressão deste marcador, muitas vezes, pode ser de baixa intensidade. O nano anticorpo mostrou ser um marcador adicional e útil na detecção de DRM em pacientes pós terapia alvo anti-CD38 (Dartumumab) trazendo maior confiabilidade na análise.

O anticorpo CD38 Nano Anticorpo de Camelo (JK36) oferece oportunidade aos laboratórios de citometria de fluxo de monitorar, com maior precisão, a resposta às terapias anti-CD38. A tecnologia de nano anticorpo aumenta a capacidade de detecção de DRM por citometria de fluxo na era da imunoterapia.