A hemofilia A adquirida (AHA) é uma doença hemorrágica adquirida rara caracterizada pela presença de autoanticorpos neutralizantes anti-FVIII. Sua incidência é maior em indivíduos idosos e há poucos estudos que permitem compreender os mecanismos fisiopatológicos responsáveis pela quebra da tolerância imunológica e pela autorreatividade dos linfócitos B.

Determinar os mecanismos imunes envolvidos na AHA através da avaliação longitudinal da produção de citocinas por linfócitos B e T isolados de pacientes com AHA.

Este é um estudo unicêntrico longitudinal que incluiu 20 pacientes diagnosticados com AHA. As células mononucleares de sangue periférico (PBMC) foram coletadas dos pacientes durante todo o acompanhamento, incluindo: (1) ao diagnóstico antes do início da terapia imunossupressora (TI), (2) durante a TI, (3) quando alcançaram remissão completa (RC, com títulos de inibidor <0,6 UB/mL e FVIII >50 UI/dL), ou (4) quando considerado falha ao tratamento, ou recidiva. Para as análises celulares, o PBMC foi descongelado e cultivado em meio RMPI-1640, na proporção de 7,5 × 105 células/poço em placas de 48 poços. Após 24h, as células foram estimuladas com 1 UI/poço de fator VIII recombinante (rFVIII). Após 24h, as células foram marcadas com anticorpos monoclonais anti-CD4, anti-CD25-FoxP3, interleucina (IL)-17a, IL-4, TGF-b, IFN-γ, TNF-α, IL-21, anti-CD19, BAFF, APRIL e SHIP-1 e analisadas por citometria de fluxo no citômetro FACSCalibur™.

A TI de primeira linha mais utilizada foi a combinação de prednisona e ciclofosfamida (85%), seguida da monoterapia de prednisona (10%) ou ciclofosfamida (5%). Desta coorte, 70% dos pacientes alcançaram remissão completa, onde 55% mantiveram a remissão sustentada e 15% recaíram. Além disso, 10% foram censurados, 10% evoluíram com falha à TI e 10% ainda estão em acompanhamento. Ao comparar os níveis intracelulares das interleucinas (IL) de indivíduos saudáveis com dos pacientes ao diagnóstico, observou-se que todos os pacientes com AHA possuem produção aumentada de IL produzidas por diferentes tipos de linfócitos TCD4+, incluindo: Th17 [IL-17a (p = 0,0002) e TGF-b (p = 0,004)] e Tfh [IL-21 (p = 0,007)]. Além disso, foi possível observar aumento na expressão de APRIL (p = 0,001) e BAFF (p = 0,005). Ao diagnóstico os pacientes que recidivaram ou falharam após TI também apresentaram elevada produção de IL em células Th1 [TNF-a (p = 0,006) e IFN-γ (p = 0,0007)] e Th2 [IL-4 (p = 0,004)]. Observamos anteriormente que mais de 90% dos pacientes com AHA produzem IgG4 anti-FVIII ao diagnóstico. Encontramos correlação positiva entre a IgG4 e os níveis intracelulares de IL-4 (r = 0,8986) e IL-21 (r = 0,9856) ao diagnóstico dos pacientes que recidivaram.

Nesse estudo os pacientes com remissão completa sustentada apresentaram resposta imune Th17 e Tfh. Além disso, observamos uma resposta imune Th1 e Th2, associada a elevada expressão do BAFF nos pacientes que posteriormente evoluíram com recorrência da resposta autoimune ao FVIII.