
A interferência nos testes imunohematológicos em pacientes submetidos ao tratamento com Anti-CD38 (DARA) pode ocasionar atrasos e outras complicações na liberação dos hemocomponentes para a transfusão. Atualmente, para eliminar esta interferência, as hemácias são tratadas previamente aos testes, de forma eficaz, com DTT 0,2M. O tratamento exige períodos longos de incubação e, além de desnaturar as proteínas CD38, pode destruir vários outros antígenos dos grupos sanguíneos. Assim, foi validado um método mais rápido através do tratamento das hemácias com DTT de baixa concentração, adicionado durante os testes, diretamente nas colunas do gel (BioRad, Suíça).
Materiais e métodosAmostras de 12 pacientes com interferência da droga e contendo anticorpos das classes IgG (anti-K, -E, -D, -JKa, -Fya, -Dia) e IgM (Anti-M) foram analisadas com DTT nas concentrações 0,01M, 0,02M, 0,03M e 0,04M. Para tal, foram avaliados dois períodos diferentes de incubação a 37oC (15 e 30 minutos). Assim, 50μl de hemácias de triagem ID-Diacell I-II-II (BioRad, Suíça) foram adicionados em micropoços de cartões LISS/Coombs (BioRad, Suíça) e, em seguida, 25μl de cada concentração de DTT. Como controle do fator de diluição, em outro cartão, o DTT foi substituído por SST 0,9%. Após a incubação, os soros testes foram pipetados aos respectivos micropoços e uma nova incubação (duas baterias distintas de 15 e 30minutos) a 37°C foi realizada, seguida da centrifugação por 10 minutos (1030 rpm).
ResultadosAs concentrações 0,01M e 0,02M mostraram-se eficazes em eliminar a interferência do DARA com o tempo de incubação de 30 minutos. Porém, as concentrações 0,03M e 0,04M foram capazes de inativar o CD38 com apenas 15 minutos de incubação. Todos os soros contendo anticorpos da classe IgG testados, mesmo nas diversas concentrações de DTT e diferentes períodos de incubação, mantiveram a reatividade dos anticorpos, inclusive o Anti-K. Adicionalmente, verificou-se que o DTT, em todas as concentrações, por estar em contato direto com os soros até a leitura dos testes, foi capaz de inativar os anticorpos anti-M (IgM). O tempo de processamento dos testes foi reduzido em 43% quando comparado à técnica de DTT 0,2M, passando de 70 para 40 minutos.
ConclusãoO uso de DTT de baixa concentração mostrou-se eficaz na eliminação da interferência do Anti-CD38 nos testes pré-transfusionais de rotina. Uma ressalva apontada foi a destruição de anticorpos da classe IgM (anti-M), entretanto, isso não é uma desvantagem, uma vez que estes anticorpos, em sua maioria, não possuem importância clínica. Em concordância com outros autores1, a concentração ideal escolhida foi de 0,04M, pois além da inativação do CD38 nas hemácias tratadas, houve o benefício do tempo de incubação reduzido (15 minutos) e a manutenção da integridade dos antígenos do sistema KEL.