
Avaliar o desempenho dos sistemas de Cromatografia Líquida de Alta Performance (HPLC) nos modelos Ultra2 Resolution e Premier Resolution para os perfis de hemoglobinas (Hbs) anormais.
Material e MétodosO estudo envolveu 74 amostras de indivíduos adultos enviadas ao Laboratório de Genética e Biologia Molecular – UFMS/CPTL, no período de 2019 a 2021, para diagnóstico laboratorial de hemoglobinopatias. As amostras foram submetidas à análise cromatográfica (HPLC - modelos Ultra2 Resolution e Premier Resolution, Trinity Biotech) e todos os perfis foram confirmados por análises moleculares (PCR-RE e sequenciamento do gene beta globina – HBB, sequenciador 3730 xl DNA Analyzer). Os cromatogramas foram avaliados quanto ao tempo de retenção relativo (RRT) e quanto às concentrações das frações detectadas, traçando-se a correlação entre as Hbs.
ResultadosOs RRT observados para Hb A, Hb S, Hb F e Hb C estiveram dentro do esperado, enquanto Hb A2, Hb D-Los Angeles e Hb Korle Bu apresentaram valores de RRT fora do intervalo esperado, necessitando de ajuste nos arquivos INI dos softwares . A sensibilidade de ambos os equipamentos foi de 100% para todos os perfis identificados, e todas as Hbs apresentaram correlação forte e estatisticamente significativa entre os equipamentos.
DiscussãoA HPLC de troca catiônica é um método comumente utilizado em laboratórios para o direcionamento no diagnóstico de hemoglobinopatias, e a avaliação dos diferentes equipamentos disponíveis é essencial para a validação do método. Nesse âmbito, as análises performadas demonstraram o ótimo desempenho de ambos os equipamentos para a identificação de perfis de hemoglobinas anormais. Todavia, é importante ressaltar que os equipamentos de HPLC fornecem apenas uma indicação da hemoglobina anormal, e a confirmação do perfil por métodos complementares, como análises moleculares, é necessária.
ConclusãoConclui-se, portanto, que os modelos Ultra2 Resolution e Premier Resolution obtiveram alto desempenho na identificação de Hbs anormais e são válidos para o direcionamento do diagnóstico de hemoglobinopatias.