A Medula Óssea (MO) possui um nicho de interações entre células, moléculas e proteínas, que proporcionam a manutenção da homeostasia. A quebra dessa homeostasia pode ser causada através modulação das proteínas encontradas na própria superfície celular, como o CD44, uma molécula que medeia a comunicação, migração e adesão celular. Diante do exposto, o objetivo deste trabalho foi identificar a presença da glicoproteína CD44 em pacientes com Leucemia Mieloide Aguda (LMA), visando esclarecer mecanismos celulares associados a homeostasia do microambiante medular e a fixação do clone leucêmico.

Esse trabalho foi aprovado pelo comitê de ética (CAE: 83186017.6.0000.5190). As amostras foram cedidas pelo Biobanco de reposição do IMIP. Foram utilizadas 15 amostras, sendo 5 pacientes com LMA, 5 pacientes com LMA-M3 (leucemia promielocítica aguda) e 5 pacientes controles. As células (PBMCs) foram obtidas através da separação dos componentes da MO por centrifugação, utilizando gradiente de densidade Ficoll-Hystopaque. As amostras congeladas tinham 5×106 de células, 70% de RPMI, 20% de SFB e 10% de DMSO, armazenadas no -80°C. Após descongeladas, essas células foram submetidas a verificação da viabilidade com o 7AAD (7-Aminoactinomicina D). Determinamos um painel de marcação com o CD44 (J.173- Alexa Fluor 750, beckman coulter) e com o CD45 (2D1-V500, becton dickinson). A fluorescência foi mensurada no citômetro FACSCanto II (Becton Dickson, San Jose, EUA), para a análise da citometria o software utilizado foi o Kaluza, Beckman Coulter, Life Sciences e para a análise estatística foi utilizado o teste ANOVA- Kruskal-wallis, através do GraphPad Prism.

Para a viabilidade, a média encontrada nos pacientes controle foi de 90% (DP: 4,61), 64% para os pacientes com LMA-M3 (DP 24,43) e 67% para os pacientes com LMA(DP 30,13). A análise realizada foi segmentada em: CD44+/CD45- e CD44+/CD45low. Obtivemos nas amostras controle uma média de 3,80% para o CD44+/CD45- (min: 0,25; max: 16; DV: 6,85; mediana: 92) e 15,90% para o CD44+/CD45low (min: 14,09; max: 18; DV: 1,39; mediana: 16). Para as amostras dos pacientes com LMA-M3, encontramos uma média de 30,80% para o CD44+/CD45- (min: 5,57; max: 52; DV: 18,69; mediana: 31), e de 20,80 para o CD44+/CD45low (min: 7,52; max: 36; DV: 12,25; mediana: 20). Para os pacientes com LMA, obtivemos uma média de 21,13 para o CD44+/CD45- (min: 1,36; max: 43; DV: 16,53; mediana: 23) e 32,79 para o CD44+/CD45low (min: 6,29; max: 90; DV: 33,36; mediana: 19). Cruzando os grupos controles e leucêmicos, encontramos para o CD44+/CD45- resultados significativos de p-value = 0,0207 (p-value < 0,05) e com o teste de comparações múltiplas de Dunn o resultado significativo se mostrou entre o grupo controle e LMA-M3. Para o CD44+/CD45low não encontramos resultados estatisticamente significativos, p-value = 0,5117.

Essa glicoproteína tem sido intitulada como um possível marcador cancerígeno e indutor da metástase. Os resultados obtidos podem evidenciar como o precursor das células leucêmicas se fixa no microambiente medular e propicia a reincidiva da doença.

Em resumo, esses resultados podem auxiliar na compreensão da diligência do CD44 na fixação das células cancerígenas, evidenciando o seu papel atuante no microambiente medular, podendo ser um importante marcador prognóstico e alvo terapêutico.