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Vol. 42. Issue S2.
Pages 444-445 (November 2020)
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DESENVOLVENDO UM ALGORITMO SIMPLES BASEADO EM CITOMETRIA DE FLUXO MULTIPARAMÉTRICA PARA RASTREAMENTO RÁPIDO DE LEUCEMIA PROMIELOCÍTICA AGUDA
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V.C. Silva, K.B. Pagnano, G.B. Duarte, M.D.B. Pellegrini, B.K.L. Duarte, K. Metze, I. Lorand-Metze
Centro de Hematologia e Hemoterapia, Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP), Campinas, SP, Brasil
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Introdução: A leucemia promielocítica aguda (LPA) é um tipo de leucemia aguda genética e molecularmente bem definida que é curável, mas tem uma mortalidade precoce frequente devido a sangramento. Portanto, há uma necessidade de uma triagem diagnóstica rápida para iniciar a terapia apropriada. A citometria de fluxo multiparamétrica (MFC) geralmente é realizada em todos os tipos de leucemias mieloides agudas (LMA), mas apenas algumas características foram descritas como sendo características da LPA. Objetivo: desenvolver um algoritmo de diagnóstico baseado na intensidade de expressão de vários antígenos examinados pelo MFC na LMA que possam discriminar de forma confiável entre a LPA e os outros tipos de LMA. Material e métodos: LMAs consecutivamente diagnosticadas e tratadas em nossa instituição nos últimos 2 anos entraram no estudo. A imunofenotipagem foi incluída na investigação diagnóstica. Foi utilizada uma plataforma de 8 cores baseada nas recomendações da Euroflow. A intensidade média de fluorescência (MFI) de cada antígeno testado foi avaliada e as que melhor discriminaram entre LPA e todos os outros tipos de LMA foram obtidas por uma análise discriminante. As características fenotípicas dos mieloblastos normais, extraídas de exames de MFC da medula óssea (BM) realizados para o diagnóstico de citopenias, foram utilizados como controle. Resultados: 24 casos de LPA e 56 casos de outra LMA primária entraram no estudo. Idade média: 39 (23–56) e 62 (26–81) anos, respectivamente. Em relação aos grupos de risco da ELN de casos não relacionados a LPA, 13 eram de risco favorável, 26 eram intermediários e 9 eram de risco adverso. Em 8 casos, a avaliação de risco não foi possível realizar devido à ausência de citogenética. Além disso, entre os pacientes com LPA, 7 casos apresentaram uma mutação no FLT3-ITD. Entre os LMA não LPA, 4 tiveram mutação FLT3-ITD, 4 tiveram NPM1 e 10 tiveram mutação FLT3-ITD e NPM1. Em relação à expressão do antígeno, o CD34 foi expresso em apenas 1/24 amostras de APL e em 18/56 amostras de LMA não-LPA. As seguintes características de fluxo foram expressas diferencialmente nos dois grupos: SSC (p<0,0001), CD45 (p=0,02), CD13 (p=0,001), CD64 (p=0,004), HLA-DR (p<0,0001) e CD33 (p <0,0001) (tabela 1). Na análise discriminante, MFI CD34 e MFI HLA-DR foram capazes de classificar com precisão LPA e LMA não-LPA em apenas 62,5%. No entanto, após a adição da razão do SSC entre blastos e linfócitos, esses três parâmetros foram capazes de diferenciar LPA de LMA não-LPA em 91,2% dos casos. Conclusão: O MFC foi adequado para uma triagem rápida de LPA na maioria dos casos. A expressão de CD34 não foi muito útil, pois muitas LMAs não expressam esse antígeno, semelhante ao LPA, mas o SSC, juntamente com o HLA-DR, poderia discriminar ambos os tipos de leucemia na maioria dos casos.

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Hematology, Transfusion and Cell Therapy
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