Um dos fatores conhecidos como desencadeantes de crises vaso-oclusivas (CVO) na doença falciforme (DF) é a infecção viral, que exacerba processos inflamatórios agudos e promove a produção de citocinas que aumentam a adesão vascular. Conhecer o perfil imunológico destes pacientes, sobretudo relacionado aos linfócitos TCD8 e células natural killer (NK), responsáveis pela defesa celular contra vírus, pode auxiliar na compreensão da fisiopatologia das CVO relacionadas a estas infecções.

Avaliar o perfil imune relacionado aos linfócitos citotóxicos de crianças com DF e comparar entre os genótipos da doença.

Foram analisadas as células mononucleares do sangue periférico de 22 pacientes com DF, com idade de a 1 a 13 anos , com os seguintes genótipos: HBSS, HBSꞵ0 e HBSC. O RNA total foi extraído e transcrito utilizando-se kits comerciais. A quantificação da expressão dos genes que codificam a perforina, granzima B, FAS ligante, Tbet, IL-2, IL-12, IFNγ foi realizada por qPCR, utilizando-se sondas TaqMan. Adicionalmente, foi quantificada por citometria de fluxo a expressão de perforina nas formas total e ativada e granzima B em células TCD8 e NK, na ausência ou presença de estímulo com IL-2 (37°C por 72h), em sete pacientes com DF (quatro HbSS, um HbSꞵ0 e dois HbSC).

Em relação à expressão dos genes avaliados, foi possível observar que pacientes HbSC apresentaram menor quantidade de transcritos de PRF1, GZMB, FASL, IFNG, TBX21 e uma maior expressão de IL2 comparados àqueles com genótipo HbSS e HBSꞵ0. Na avaliação da produção de proteínas citolíticas, pacientes HbSS e HbSꞵ apresentaram maior quantidade de linfócitos T CD8 expressando PrF ativada na ausência de estímulo (p = 0,040). Entretanto, após o estímulo com IL-2, indivíduos HbSS e HbSꞵ apresentaram menor quantidade de células NK que expressavam perforina total e granzima B em comparação àqueles HbSC (p = 0,0014 e p = 0,024, respectivamente). As demais análises, incluindo comparações quanto ao uso de hidroxiureia não mostraram diferenças significativas.

Os dados indicam que pacientes com genótipo HbSC apresentam menor expressão de genes citotóxicos (PRF1, GZMB, FASL, IFNG, TBX21) e maior expressão de IL2, sugerindo uma resposta imune menos citotóxica. Já indivíduos HbSS e HbSβ0 mostraram maior frequência de linfócitos T CD8 com perforina ativada sem estímulo, indicando ativação basal aumentada. No entanto, após estímulo com IL-2, esses mesmos genótipos apresentaram menor resposta das células NK, com menor expressão de perforina e granzima B, sugerindo possível exaustão funcional. O uso de hidroxiureia não influenciou significativamente os resultados. Esses achados destacam diferenças imunológicas importantes entre os genótipos, com implicações potenciais no prognóstico e manejo da doença falciforme. Os resultados indicam que pacientes HbSC têm menor expressão de genes citotóxicos e maior expressão de IL2, sugerindo menor ativação imune. Já HbSS e HbSβ⁰ apresentam maior ativação basal de linfócitos T CD8, mas menor resposta de células NK ao estímulo.