O tolinapant (ASTX660) é um antagonista das proteínas inibidoras da apoptose (IAPs) cIAP1 (BIRC2), cIAP2 (BIRC3) e XIAP. Essas IAPs atuam inibindo a atividade das caspases, suprimindo a apoptose. Recentemente, o tolinapant foi introduzido no tratamento de neoplasias hematológicas e demonstrou resultados promissores em modelos pré-clínicos de linfoma de células T (TCL), com efeitos imunomodulatórios benéficos confirmados em um pequeno grupo de pacientes com TCL. Na leucemia mieloide aguda (LMA), um estudo avaliando o tolinapant como agente único e em combinação com a cedazuridina (ASTX727) em pacientes com LMA recidivada/refratária foi encerrado precocemente (NCT04155580).

Investigar a base farmacológica e molecular da atividade do tolinapant, bem como o papel de seus alvos, no contexto da LMA.

Investigamos os alvos do tolinapant (BIRC2, BIRC3, XIAP) quanto à expressão, impacto prognóstico e relevância funcional em LMA. Foram utilizados dados de pacientes da coorte TCGA (n = 121), dados ex vivo da coorte BeatAML (n = 570) e dados do DepMap com deleção de BIRC2, BIRC3 e XIAP em 25 linhagens celulares. Avaliamos a citotoxicidade do tolinapant (0–100 µM) em 14 linhagens de LMA por ensaio MTT. Testes combinatórios com venetoclax foram realizados em linhagens resistentes (Kasumi-1 e OCI-AML3), usando MTT (25 combinações), citometria de fluxo (Annexina V/PI) e Western blot (PARP1 clivado, γH2AX). Sobrevida foi analisada por Kaplan– Meier, e associações por testes estatísticos apropriados (ANOVA, Spearman, log-rank). Valores de IC50 foram obtidos por regressão não linear, e escores ZIP de sinergia foram gerados com SynergyFinder.

Alta expressão de BIRC2 (p = 0,04) foi associada à pior sobrevida global, enquanto BIRC3 e XIAP não mostraram essa associação. BIRC3 foi mais expresso em pacientes de risco intermediário. Citogeneticamente, BIRC2 esteve aumentado em del(5), t(9;11)+outros e del(7q); BIRC3 em del(7q)+outros e del(5q)+outros; XIAP foi reduzido em del(5). Em análises ex vivo, BIRC2 associou-se com resistência a 20 agentes, BIRC3 a 28 (e sensibilidade a 7), e XIAP a 12 (e sensibilidade a 20), todos com p < 0,05. No DepMap, observou-se dependência moderada de BIRC2 (−0,334) e mínima para BIRC3 e XIAP. O tolinapant isolado apresentou citotoxicidade modesta (IC50 mensurável em 5/14 linhagens; faixa: 29,8–77,2 µM; eficácia de 13,6% a 99,9%). Combinações com venetoclax mostraram sinergia em Kasumi-1 (ZIP = 13,8) e efeito aditivo em OCI-AML3 (ZIP = 8,4), com aumento de apoptose (p < 0,05). Análises moleculares revelaram maior clivagem de PARP1 e acúmulo de γH2AX com a combinação.

Nosso estudo revela que a alta expressão de BIRC2 está associada a pior prognóstico e resistência a múltiplos agentes em LMA, sugerindo seu potencial como biomarcador e alvo terapêutico. Embora o tolinapant tenha eficácia limitada como agente único, sua combinação com venetoclax apresentou efeitos sinérgicos ou aditivos em modelos resistentes. Esses achados sustentam o potencial de terapias combinadas baseadas em tolinapant em subgrupos específicos de LMA.

FAPESP, CAPES e CNPq.