Selantes de fibrina são compostos por fibrinogênio e trombina, que quando misturados reproduzem a etapa final da cascata da coagulação, formando o coágulo de fibrina. Esses selantes são utilizados na prática cirúrgica devido a suas propriedades físicas e biológicas, que apresentam vantagens em comparação às suturas tradicionais, como uma maior compatibilidade fisiológica, biodegradabilidade e melhor recuperação do paciente pós-cirurgia. No entanto, a produção de selantes de fibrina pela indústria de hemoderivados requer um grande aparato tecnológico, que tende a elevar o custo de sua produção e inviabilizar sua utilização em larga escala.

Esse trabalho teve como objetivo desenvolver uma metodologia simples e de baixo custo para se obter trombina e fibrinogênio humanos a partir de uma unidade de plasma.

Foram fracionadas fontes de fibrinogênio (crioprecipitado) e protrombina (euglobulinas plasmáticas) de unidades individuais de plasma com sorologia negativa, utilizando métodos de precipitação proteica físico-químicos. A quantidade de fibrinogênio no crioprecipitado foi dosada por ensaio coagulométrico automatizado. A integridade da protrombina precipitada foi avaliada qualitativamente por meio do teste de TTPa. Carbonato e cloreto de cálcio foram avaliados como fonte de cálcio para promover a ativação da protrombina em trombina, por meio de um teste de formação de coágulo, e a concentração da solução contendo trombina foi determinada pelo Método de Clauss Invertido. Cloridrato de vancomicina 50 mg/mL e sulfato de gentamicina 40 mg/mL foram adicionados a formulação em diferentes concentrações para avaliar a compatibilidade desses antimicrobianos com a matriz de fibrina.

A protrombina foi convertida em trombina pela adição de 10 mL de carbonato de cálcio 0,2M. A dosagem de fibrinogênio indicou a presença de 1,5g/dL ±0,9 dessa proteína no crioprecipitado, enquanto a trombina apresentou uma concentração de 388,66 ±98,72 UI/mL. O coágulo originado da mistura entre fibrinogênio e trombina formou-se instantaneamente, apresentando grande estabilidade e alta aderência à parede do tubo de ensaio. Vancomicina e gentamicina mostraram-se compatíveis à formulação.

A concentração de fibrinogênio encontrada é cerca de dez vezes maior do que a concentração mínima preconizada pela Portaria Consolidada N°5 do Ministério da Saúde, que determina que o crioprecipitado para uso hemoterápico deve conter no mínimo 150 mg/dL dessa proteína. A solução de trombina obtida pela metodologia desenvolvida no presente trabalho possui uma concentração média da enzima muito similar às dos selantes de fibrina industriais e maior do que as encontradas por grupos de pesquisa que publicaram trabalhos similares. A compatibilidade dos antibióticos com o selante pode contribuir para uma maior segurança em sua utilização.

A metodologia desenvolvida neste trabalho mostrou-se eficaz para a obtenção das principais proteínas plasmáticas que compõem um selante de fibrina, a partir de técnicas simples de fracionamento plasmático. Essa nova técnica mostra-se uma alternativa promissora e econômica para a produção, em escala laboratorial, de selantes de fibrina autólogos em hemocentros brasileiros.