O Mieloma Múltiplo (MM) é uma neoplasia maligna caracterizada pela proliferação e infiltração de plasmócitos monoclonais na medula óssea (MO). O principal tratamento para o MM é o transplante autólogo de células-tronco hematopoiéticas (TACTH), porém cerca de 60% dos pacientes elegíveis para TCTH podem apresentar recidiva. Portanto, novas abordagens imunoterapêuticas podem representar uma alternativa, com atenção especial ao uso de estratégias baseadas em terapia celular, como células dendríticas derivadas de monócitos (moDC) e macrófagos derivados de monócitos (moMac). Considerando que o MM está afetando diretamente o nicho da MO, hipotetizamos que as células tumorais podem afetar o perfil molecular dos precursores de monócitos. Assim, nosso objetivo é caracterizar o perfil molecular e funcional dos monócitos do sangue de pacientes com MM, avaliando seu transcriptoma e a capacidade dos monócitos de pacientes em se diferenciar em DCs e macrófagos.

O sangue periférico de doadores saudáveis (HD) (n = 20) e de pacientes com MM (n = 30) serão coletados com consentimento por escrito. Após o processamento do sangue, monócitos CD14+ serão isolados e submetidos à extração de RNA e sequenciamento de RNA. Uma fração de monócitos CD14+ será cultivada usando protocolos distintos de diferenciação por sete dias: Mac inflamatório (citocinas GM-CSF+IFN-gama), Mac anti-inflamatório (citocinas M-CSF+IL-4) e DC (GM-CSF + citocinas IL-4). Nas últimas 24h, as células serão ativadas por LPS ou TNF-alfa recombinante. Após a diferenciação, realizaremos a imunofenotipagem por citometria de fluxo avaliando: CD1c, CD14, CD16, CD86, CD163 e PD-L1.

Dados preliminares de HD (n = 2) e MM (n = 1) inflamatórios diferenciados de moMac revelaram down-regulation de CD163 e up-regulation de moléculas PD-L1 quando comparados a monócitos indiferenciados. O moMac anti-inflamatório mostrou regulação positiva de CD163 e CD16 em comparação com todos os outros tipos de células. As moDCs diferenciadas foram caracterizadas por uma regulação negativa de CD14 e regulação positiva de CD1c quando comparadas a outros tipos de células. Sob estimulação de TNF-alfa e LPS, notamos uma regulação positiva de CD86 e PD-L1 em moDCs derivadas de pacientes com MM, mas não foram observadas diferenças nessas moléculas em moMac inflamatório após a ativação.

Nossos dados indicam uma diferenciação esperada frente aos estímulos por citocinas, porém necessitamos um aumento do número amostral para delinear o panorama molecular e funcional dos monócitos em pacientes com MM.

CNPQ, CAPES e PRONON.