A Trombose Venosa Profunda (TVP) é caracterizada pela formação de um trombo dentro de veias, e decorrente de distintos processos fisiopatológicos tais como alterações no endotélio. A utilização de células endoteliais formadoras de colônia (CEFCs) como modelo de investigação ex vivo do endotélio se torna interessante na TVP, em que a impossibilidade de uma análise direta do endotélio dificulta a compreensão do seu real papel na doença. Ainda, se faz necessário o entendimento do papel destas células na fase aguda da TVP, representada como um momento crítico da interação do endotélio no reparo tecidual e homeostático.

Caracterizar e avaliar a função das CEFCs isoladas de pacientes com TVP aguda em comparação ao grupo controle (CN), composto de indivíduos saudáveis.

Análise de sangue periférico por punção de pacientes com TVP de membros inferiores na fase aguda para realização dos testes: (1) citometria de fluxo para identificação das células endoteliais maduras circulantes (CECs); (2) hemograma; (3) imunoensaio multiplex para identificação de marcadores plasmáticos; e (4) sistema óptico de análise celular em tempo real para avaliação da funcionalidade de CEFCs isoladas.

Este estudo foi divido em dois grupos: (1) Foram captados 38 CN (36 ±10 anos) e 25 TVP aguda (45 ±13 anos), sendo prevalente o sexo feminino em ambos os grupos. Dos 25 pacientes, 64% apresentavam fatores de risco transitório maior ou menor, 96% estavam sob uso de anticoagulante oral, e o intervalo entre diagnóstico e captação para o estudo foi de 12 ±13,6 dias. Observamos um aumento significativo nas interleucinas (IL) IL-6, IL-8, PDGF-AA/AB e da molécula de adesão P-selectina, e frequência elevada de CECs na TVP aguda em relação aos CNs. Não observamos alterações dos componentes celulares entre as coortes. No grupo (2) observamos as primeiras colônias de CEFCs com 14 (±4) dias de cultura e o tempo de surgimento das CEFCs não variou entre os grupos. As CEFCs foram caracterizadas como positivas para marcadores endoteliais (CD146, CD144, CD309, CD31) e negativas/baixa expressão para linhagem hematopoiética e leucocitária (CD133, CD34, CD45 e CD14). O sucesso na obtenção das CEFCs foi de 36% (n = 14) nos CN e 20% (n = 5) nos pacientes com TVP, destes apenas 2 apresentavam fator de risco menor (40%), o uso de anticoncepcionais. Os testes de função celular revelaram CEFCs com menor capacidade proliferativa (1.3 vs 1.7-folds, p = 0,3) e de migração celular (27,6 % vs 39,8% de relative wound density, p = 0,05) nas CEFCs TVP. Além disso, CEFCs CN sob efeito de plasma de TVP demonstraram uma redução na proliferação (p = 0,03). Também observamos o aumento da expressão de IL-6 no sobrenadante das CEFCs TVP aguda.

Este estudo original e preliminar demonstrou ser possível estabelecer o isolamento das CEFCs em pacientes com TVP na fase aguda. Observamos alterações das propriedades funcionais, como na capacidade replicativa e de reparo celular, e um aumento nos níveis de interleucinas pró-inflamatórias que também poderiam afetar a resposta celular. Por fim, evidenciamos que há a disfunção de células endoteliais em pacientes com TVP aguda, e isso poderá afetar a capacidade de reparação da lesão tecidual, acarretando complicações futuras na TVP de fase tardia. Este estudo abre diversos questionamentos, cuja investigação poderá contribuir para medidas de conduta e tratamento na fase aguda da TVP.