A leucemia mieloide aguda (LMA) é uma neoplasia hematológica caracterizada pela proliferação de células precursoras hematopoiéticas mieloides (blastos) na medula óssea. Acomete principalmente adultos, perfazendo cerca de 80% dos casos, com maior incidência na população maior de 60 anos. Objetivo: Avaliar a contribuição e complementaridade entre as técnicas de cariótipo, hibridação fluorescente in situ (FISH) e sequenciamento de nova geração (SNG) em casos de LMA, ao diagnóstico, selecionados no período de 30/01/2020 a 06/07/2024, destacando situações de concordância, divergência e exclusividade de achados.

Avaliar a contribuição e complementaridade entre as técnicas de cariótipo, hibridação fluorescente in situ (FISH) e sequenciamento de nova geração (SNG) em casos de LMA, ao diagnóstico, selecionados no período de 30/01/2020 a 06/07/2024, destacando situações de concordância, divergência e exclusividade de achados.

O cariótipo foi realizado, a partir de cultura de curta duração, pelo método de coloração de banda G. O processamento do SNG consistiu na extração de DNA e de RNA em amostra de sangue ou de medula óssea submetidos ao sequenciamento na plataforma NextSeq500 (Illumina) e posterior análise das variantes de 69 genes (42 genes completos e 27 genes com regiões hotspot) e de região de fusão de 27 genes envolvidos nas neoplasias mieloides. A FISH foi realizada a partir de sondas fluorescentes para identificar alterações cromossômicas específicas que permitem a detecção das anormalidades genéticas frequentes em LMA, como rearranjos PML/RARA e AML1RUNX1T1/RUNX1, além dos que envolvem os oncogenes EGR1, TP53, MLL (KMT2A), RELN, CBFB/MYH11 e PTPRT. Foram analisados retrospectivamente 15 casos que todos os pacientes foram submetidos às técnicas de cariótipo, FISH e SNG, no momento do diagnóstico. Registrou-se a presença de alterações citogenéticas e moleculares detectadas por cada método, bem como casos com achados exclusivos de cada técnica.

A coorte incluiu 7 pacientes do sexo masculino e 8 do feminino, com idades entre 45 e 76 anos (média= 67 e mediana=68). Pelo cariótipo foram detectadas 66,7% alterações (10 casos), sendo 6 classificados como cariótipos complexos (≥3 alterações). Pela FISH foram detectadas 66,7% alterações (10 casos), com maior frequência de deleção 7q31.2 (18,1%), cópia adicional de RUNX1T1 (13,6%), deleção de RELN (13,6%) e cópia adicional de MLL (13,6%). Por sua vez, o SNG detectou alteração em todos os 15 casos (100%). Em 33,3% dos casos, o cariótipo e a FISH foram normais, mas o SNG permitiu identificar alterações relevantes para o diagnóstico. Enquanto pela FISH foi possível complementar todos os cariótipos complexos. Dessa forma, todas as técnicas trouxeram informações que contribuíram para o diagnóstico dos pacientes nesse estudo.

A análise integrada das técnicas envolvidas no estudo demonstra-se essencial no diagnóstico de LMA dada a possibilidade de cada método revelar achados exclusivos e clinicamente relevantes. Esses dados sustentam a recomendação de combinação de técnicas, mesmo em cenários de custo-efetividade restrito, visando sempre a melhor caracterização possível da doença. Portanto, o cariótipo foi fundamental para identificar alterações cromossômicas complexas e clonalidade, a FISH detectou rearranjos submicroscópicos, não identificáveis ausentes no cariótipo e o SNG revelou mutações pontuais e fusões não visíveis nas demais metodologias.