As neoplasias mieloides (NMs) são um grupo heterogêneo de neoplasia hematológica que inclui a leucemia mieloide aguda (LMA), síndromes mielodisplásicas (SMD), neoplasias mieloproliferativas (NMP) e as neoplasias mielodisplásicas/mieloproliferativas (SMD/NMP). A classificação da Organização Mundial da Saúde (OMS) para NM tem consolidado a importância das alterações moleculares no diagnóstico e prognóstico dessas neoplasias. Com a crescente utilização da abordagem genômica nos estudos de NMs, novos biomarcadores moleculares tem se mostrado relevantes para o prognóstico e terapêutica. Painéis multigenes de sequenciamento de nova geração (NGS) permitem uma análise mais completa de alterações genéticas diversas, como variantes de nucleotídeo único (SNV), pequenas deleções e inserções, dentre outras. Entretanto, os benefícios da utilização de painel de NGS na investigação das NMs não estão totalmente definidos.

Investigar mutações gênicas em pacientes com diagnóstico de NM.

Entre novembro/2019 e julho/2021 foram coletadas 30 amostras de sangue periférico ou medula óssea de pacientes com diagnóstico de NM, no serviço de Hematologia do Hospital das Clínicas da UFMG. Amostras de DNA e RNA de cada paciente foram sequenciadas utilizando o painel Oncomine Myeloid Assay (Thermo Fisher Scientific), com sequenciamento de 40 genes (23 hotspots e 17 genes completos), fusões gênicas envolvendo 29 genes drivers e análise de expressão dos genes MECOM, WT1, MYC, SMC1A e BAALC.

Foram sequenciadas amostras de 30 pacientes: 11 SMD (36,7%), 10 (33,4%) LMA, 6 NMP (20,0%), 2 SMD/NMP (6,7%) e uma leucemia aguda de fenótipo misto (3,3%). A mediana de idade foi de 52 anos (18 a 83 anos). Dezenove pacientes (63,3%) eram do sexo masculino e 11 (36,7%) do sexo feminino. Em 26 casos (86,7%) foi detectada pelo menos uma mutação, com o número por caso variando de 1 a 5. Foram detectadas um total de 57 mutações em 22 genes, sendo mais frequentes as mutações em TET2, IDH2, FLT3 (ITD) e ASXL1. Foram detectadas mutações em todos os casos de LMA, destacando-se também pelo maior número de mutações, sendo mais frequente a mutação FLT3 -ITD. As mutações FLT3 -ITD tiveram razão alélica mutante/selvagem maior que 0,5; todas confirmadas por eletroforese capilar. Na SMD destacam-se as mutações em TET2 e ASXL1. Mutações em TET2 também foram as mais frequentes na NPM e SMD/NMP. Em 12 casos (40%) foi detectada pelo menos uma mutação em genes associados a prognóstico adverso, como FLT3, ASXL1, TP53, RUNX1, U2AF1 e DNMT3A. Dez (33,3%) pacientes evoluíram para óbito, sendo quatro casos de LMA (três FLT3 -ITD+e um RUNX1 mutado) e um caso de SMD AREB-2 com TP53 mutado e cariótipo complexo com monossomia de 17. Detectamos as fusões RUNX1-RUNX1T1, KMT2A-MLLT3 e PICALM-MLLT10 na LMA; e BCR-ABL1 na LMC. Mutações em TET2, SF3B1 e IDH2 foram detectadas em três casos de NPM triplo negativa. Em dois casos de LMA foi observado aumento da expressão de MYC e SMC1A.

Neste estudo detectamos uma alta frequência e co-ocorrência de mutações, algumas associadas à prognóstico adverso. A expressão aumentada de MYC e SMC1A parece estar associada a prognóstico adverso, mas há poucos estudos mostrando a relevância das análises de expressão nas NMs. Como múltiplos genes estão relacionados à patogênese das NMs, com sobreposição significativa de mutações entre os grupos, o uso de um painel NGS mieloide multigene é relevante e factível.