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Vol. 43. Issue S1.
Pages S127 (October 2021)
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Vol. 43. Issue S1.
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AVALIAÇÃO DA INFLUÊNCIA DAS CÉLULAS ESTROMAIS MESENQUIMAIS MULTIPOTENTES NA PROLIFERAÇÃO DE LINHAGENS CELULARES JAK2V617F+ MUTADAS
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GM Berbel, JG Cominal, FA Castro, MC Cacemiro
Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP), Universidade de São Paulo (USP), Ribeirão Preto, SP, Brasil
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Vol. 43. Issue S1
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Introdução

As neoplasias mieloproliferativas (NMP) BCR-ABL1-negativas clássicas caracterizam-se pelo aumento da proliferação de células mieloides precursoras e maduras. Nesse estudo, foi avaliado o efeito das células mesenquimais multipotentes (MSC) normais (HS-5), na proliferação da linhagem celular HEL 92.1.7 JAK2V617F+. As células mesenquimais constituem uma população de células não hematopoéticas presentes no nicho da medula óssea. As MSC proporcionam o microambiente medularideal para a célula tronco hematopoética manter seu potencial de auto-renovação e as protegem de estímulos pró-apoptóticos, além de desempenharem um papel imunoregulador.

Material e métodos

Células da linhagem HEL 92.1.7 JAK2V617F positiva (ATCC®TIB-180 ™), provenientes de paciente com policitemia vera que progrediu para leucemia mieloide aguda foram cocultivadas com células HS-5. As MSCna concentração de 5x10 4 células por poço foram plaqueadas em placas de 6 poços, seguido da adição de 1x10 5 células HEL.92.1.7 por poço, marcadas com o fluorocromocell-trace violet (CTV). Um milhão e duzentas mil células foram marcadas com 1μL deCTV, por 30 minutos a 37°C na ausência de luz. Em seguida o CTV não ligado foiinativado pela adição de 5 mL de meio RPMI com 10% de soro bovino fetal seguidapela centrifugação das células a 400 x g por 5 minutos e o precipitado celular foiressuspenso em meio RPMI. O cocultivo foi realizado por 24, 48 e 72 horas. Aproliferação das células HEL.92.1.7 foi analisada pela diminuição da fluorescência doCTV, por meio da análise em citômetro de fluxo (FACSCanto, BD).

Resultados

Osresultados observados indicam que as células HEL.92.1.7 cultivadas na presença da HS-5 proliferaram menos do que células cultivadas sem a interação com as célulasmesenquimais HS-5 nos tempos de 24, 48 e 72 horas (p = 0,0004; p = 0,0185; p = 0,0224, respectivamente).

Discussão

As células mesenquimais parecem desempenhar um papelimunossupressor sobre as células JAK2V617F positivas, diminuindo sua proliferaçãocelular.

Conclusão

As células estromais mesenquimais multipotentes representam uma ferramenta atraente para reduzir a resposta e proliferação de células positivasJAK2V617F. Financiamento: CAPES (código 001), CNPq and FAPESP (2018-01756-5;2018/19714-7). Palavras chave: neoplasias mieloproliferativas, células estromais mesenquimaismultipotentes, HEL 92.1.7, mutação JAK2V617F, proliferação celular.

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Hematology, Transfusion and Cell Therapy
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